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微信彩票内部人员透码:同型半胱氨酸的臨床及應用

時間:2018-03-01 來源:網絡
一、同型半胱氨酸的生物特性
    同型半胱氨酸為一種含硫氨基酸,是蛋氨酸代謝過程中的重要中間產物。于1932年由Vincent du Vigheaud從膀胱結石中分離得到,其來源于飲食攝取的蛋氨酸,是蛋氨酸循環中S-腺苷HCY水解反應后的產物,同時,又是胱硫醚β合成酶合成胱硫醚的底物。血液中的總HCY包括HCY、HCY二硫化物和胱氨酸-HCY3種形式,它們大部分以蛋白結合方式存在,小部分處于游離狀態。主要通過以下兩條途徑進行代謝:再甲基化途徑和轉硫途徑。有50%HCY重新合成蛋氨酸,另有50%生成半胱氨酸和α-酮丁酸。
    正常人群血漿中Hcy濃度為4.0 – 15.4μmol /L,1969年Mc Cully博士發現高胱氨酸尿癥和胱硫醚尿癥可弓J起全身動脈粥樣硬化并可形成血栓,首次提出了同型半胱氨酸與動脈粥樣硬化可能有關的觀點。20世紀90年代后期,對環繞同型半胱氨酸與心血管病的關系展開了大量研究,證明了高同型半胱氨酸血癥(hyperhomocysteinemina)是心血管病一個獨立危險因子。
    二、 同型半胱氨酸的臨床意義
    1、同型半胱氨酸與心血管疾病
  流行病學研究發現,Hcy水平和心血管危險因素及心血管疾病相關。***cy與反映動脈粥樣硬化臨床前期病變的IMT增厚相關,在Framingham的一項研究中發現,非空腹Hcy水平在平均年齡為70歲的老年人中是腦卒中的獨立危險因素,調整了年齡、性別、收縮壓、糖尿病、吸煙、房顫和冠心病史,Hcy水平在上四分位數與下四分位數者腦卒中相對危險為1.82(95%CI, 1.14-2.91)。Framingham系列研究還顯示了***cy血癥與顱外動脈狹窄、血管性癡呆、Alzheimer’s病、骨折和慢性心力衰竭相關。荷蘭進行的一項針對7983名研究對象的短期隨訪表明,Hcy>18.6μmol/L者發生心肌梗死和腦卒中的相對危險度分別為2.43(95%CI, 1.1-5.35)和2.53(95%CI, 1.19-5.35),在高血壓患者中相關性更明顯。
  既然流行病學研究提示Hcy與心血管疾病相關,因此引發人們對于補充葉酸和維生素B12、B6能否降低心血管事件的探討。既往有腦卒中病史患者的VISP研究沒有發現常規補充葉酸、維生素B12和B6能夠降低再發腦卒中的風險。2005年發表的NORVIT發現,包括葉酸在內的大劑量B族維生素不能預防心肌梗死患者的心血管疾病,甚至可能使其發生風險升高。HOPE2研究是在5522名55歲以上既往有冠心病、腦血管病、周圍血管病或糖尿病人群中每天補充2.5mg葉酸,50mg維生素B6和1mg維生素B12與安慰劑對照的研究。雖然沒有證明上述復合B族維生素能降低心血管死亡、心肌梗死和卒中的聯合終點,但亞組分析可以降低腦卒中危險25%。與HOPE2研究結果相同的是,我們參與完成的一項薈萃分析也證實補充葉酸可有效降低腦卒中發生風險,在腦卒中一級預防中效果更明顯。
對于流行病學研究和干預研究存在的差異,有人認為盡管明顯增高的Hcy肯定與血栓性疾病相關,但輕到中度的Hcy增高,可能是其他導致心血管疾病的原因,如腎功能損害的繼發表現,從而與心血管疾病相關聯。但動物模型也證明Hcy水平和血栓性疾病相關,因此關于Hcy與血栓性疾病的關系需要進一步的研究明確。Hcy水平不僅與動脈血栓性疾病相關,還與深靜脈血栓形成包括肺栓塞相關
    2、HCY與腎臟疾病
    與HCY代謝有關的酶胱硫醚β-合成酶(MS)及N5、N10-亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHER)廣泛分布于全身組織,但在腎臟中活性最高,腎臟疾病時影響這些酶的活性和合成,導致***CY血癥。Cuttormsen指出血漿中HCY70%由腎臟排除。因而腎小球濾過率的降低可明顯降低HCY的清除率,使HCY升高。升高的HCY血漿濃度會造成腎血管損傷,從而在***CY血癥與腎功能損害間形成惡性循環。血漿HCY在腎衰早期就可升高,并隨病情的加重而明顯,可達到23-25umol/L。在以透析維持的終末期腎衰患者中,HCY會進一步升高,且對補充B族維生素反應極差。
    3、同型半胱氨酸與妊娠相關疾病
    雖然妊娠期婦女體內Hcy水平較孕前顯著降低,但是由于妊娠期婦女對Hcy損傷敏感性增強,所以Hcy水平輕度升高就可能導致一系列的血管損害。研究表明,血Hcy水平在妊娠早期開始下降,懷孕15-17周時,降至孕前的50%-60%,然后保持穩定水平至分娩產后2-4天恢復至孕前水平。孕前血Hcy水平下降與血液稀釋以及胎兒蛋白合成需要增加有關。
    近年來發現,血漿中Hcy水平升高與習慣性流產、妊娠高血壓綜合癥(PIH)、胎盤早剝、胎兒生長受限、胎兒畸形、死胎、早產、低體重兒等的發生密切相關。Hcy致病機理的研究為多種妊娠并發癥的早期診斷、治療提供了依據。
   4、 同型半胱氨酸水平升高與老年性癡呆癥的關系
   大量研究資料表明同型半胱氨酸含量升高,或者葉酸、維生素12的缺乏,都會增大患癡呆癥的危險性。弗明漢醫學研究中心對1092名平均年齡為76歲的老年人調查結果表明:Hcy水平超出14ummol/L,患老年性癡呆癥的危險性加倍。
     三、 同型半胱氨酸的測定方法
     1、 色譜法:1987年Stabler首先報道了氣相色譜―――質譜法測定同型半胱氨酸。該法可同時測定半胱氨酸、蛋氨酸、胱硫醚和甲基甘氨酸等多種物質。雖然靈敏度、特異性好,但儀器價格昂貴而不能推廣。高效液相色譜法(HPLC)是目前比較成熟且推廣使用的方法,不足之處是樣品處理、層析條件,使其難以標準化。Fiskertrand等首先于1993年用全自動高效液相色譜法對血漿和尿液的HCY和硫醇物進行測定。HPLC根據衍生方式(柱前或柱后衍生)、檢測方法(熒光、電化學)可分為多種方法。應用HPLC準確測定同型半胱氨酸需要優良的設備、高超的技術經驗和應用HPLC方法適當的時間,另外選擇和制備內部質控也相當重要。
    2、 免疫學法:該法應用特異性的抗S-腺苷同型半胱氨酸單克隆技術,采用熒光偏振法或免疫法測定HCY.美國雅培公司采用全自動熒光偏振免疫技術,用AXSYM儀器檢測HCY,反應原理為:正常人血漿中HCY約1%以還原型存在,70%與白蛋白結合,30%形成小分子二硫化物。血漿標本在含二硫蘇糖醇的預處理液作用下,HCY、混合的二硫化物及蛋白結合型等均被還原成游離HCY形式(tHCY):tHCY在S-腺苷-L-同型半胱氨酸(SAH)水解酶和過量腺苷存在下,被轉換成SAH;預稀釋的SAH混合物、抗-SAH單克隆抗體及標記的熒光S-腺苷-L-半胱氨酸示蹤物一同孵育,儀器自動檢測偏振光的改變,即可測出標本總HCY水平。此方法快捷、操作簡單、自動化程度高,可減少人為誤差,具有良好的準確度與精密度,適合大多數臨床實驗室應用。
    3、 循環酶法
  氧化型Hcy被轉化成游離Hcy,游離Hcy在CBS催化下和絲氨酸反應生成L-胱硫醚。L-胱硫醚在CBL催化下又生成Hcy、丙酮酸和NH3。該循環反應生成的丙酮酸可以用乳酸脫氫酶LDH和NADH檢測到,NADH轉變成NAD的速率與樣品中Hcy含量成正比。該方法檢測采用全自動生化分析儀,具有穩定性好、特異性高、靈敏度高、檢測速度快等特點,與熒光偏振免疫法有很好的相關性。 

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