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透码中心欢迎阁下光临:急性腎損傷早期標志物-NGAL

時間:2018-03-01 來源:夸克官方

香港内部透码联系人 www.qubrv.com u項目簡介

中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)是分子量為25×103的分泌蛋白,1993年于中性粒細胞內的過氧化物酶顆粒中被發現。生理條件下少量合成于骨髓中性粒細胞的中幼及晚幼階段,炎癥反應和惡性腫瘤可誘使其在多組織(如子宮、前列腺、唾液腺、肺、腎、氣道及消化道上皮等)中大量生成。NGAL因其在急、慢性腎臟疾病中的生物學預警作用受到重視,被業內視為最有潛質的急性腎損傷(AKI生物標志物。近年來,其在心腦血管疾病、糖尿病等領域的研究也逐漸展開。

u臨床現狀

急性腎損傷(AKI)是近年來國際腎臟病學界提出來,并擬取代急性腎衰竭(ARF)的新概念。隨著醫學的不斷發展及人們對各種原因導致的腎功能損傷的病理生理過程的深入了解,學者們認為急性腎功能下降是由于損傷導致腎臟的功能和結構的改變所引起的,而且AKI概括了從腎功能發生改變到最終腎衰竭的整個過程,基本反應了疾病的程度和發展過程。所以AKI替代ARF的基本出發點就是將這一綜合征的臨床診斷提前,識別并進行早期干預有生物標志物改變的腎損傷,可以防止病情進一步惡化,防止其發展成腎衰竭。但是,目前還沒有AKI統一的定義、診斷及分級標準,較為公認的有RIFLE和AKIN標準。

AKI是由各種原因引起的腎功能在短時間(幾小時至幾天)內突然下降而出現的臨床綜合癥。腎功能下降可發生在原來無腎功能不全的患者,也可發生在原已穩定的慢性腎?。?/span>CKD)患者,其主要發病原因是腎灌注量減少導致血流動力學介導的腎小球濾過率降低引起腎臟局部缺血和再灌注損傷,但不存在腎實質損傷。如果能及時糾正腎灌注量減少,則能逆轉血流動力學損害,使腎功能迅速恢復,否則可發生細胞明顯損傷而導致急性腎小管壞死(ATN)。隨著科技的發展,臨床的治療及監護水平均有了很大提高,但AKI及其由此引發的合并癥發病率仍居高不下,缺乏早期敏感生物標志物是有效預防和治療AKI的主要障礙。AKI是心臟體外循環術后嚴重的并發癥之一,直接影響體外循環手術患者的預后,通過對體外循環術后AKI早期預測性的生物標志的研究,將對改善患者的預后有著十分重要的意義。

雖然目前在診斷標準、有效的預防措施、規范化的治療、多學科聯合協作模式方面取得了部分進展,但關鍵缺乏早期診斷的特異性生物學指標。目前主要以血肌酐水平作為診斷依據,但是,血肌酐是急性腎功能變化不敏感、不可靠的指標,只有約50%的腎功能喪失時血清肌酐濃度才發生變化,同時還受到年齡、進食、肌肉容量及水化等影響。以血肌酐作為AKI診斷和臨床干預的依據顯然已錯失最佳治療時機。而其它傳統的生物指標,如尿常規、尿素氮、β2微球蛋白、α1微球蛋白等也受年齡、性別、機體、病理、生理狀態等多種因素影響,導致其敏感性、特異性差,當這些指標出現異常時,其腎損傷已處于非常嚴重或不可逆的階段,并非是及時判定腎功能變化、預測臨床特征的實時指標。

uNGAL的優勢

近年來研究發現,NAGL 表達于腎小管細胞,通過鐵轉運體結合而參與鐵代謝,在腎臟發育以及腎損傷后腎小管的再生中起重要作用;在急性腎損傷及修復過程中表達增強,與腎小管損傷程度密切相關;它能在急性腎衰竭的早期判斷腎功能損傷的程度,且敏感性、特異性高,對臨床AKI的早期診斷、預防、治療和改善其預后有著重要作用。NAGL是一種調控腎小管上皮細胞凋亡的蛋白分子,正常情況下腎組織很少表達,腎缺血后NAGL基因是上調最顯著的基因之一,也是過量表達最顯著的蛋白之一。研究顯示,急性腎損傷2小時后就可以在尿液中檢測到,而血肌酐明顯改變需要3-4d,由此證明NAGL比血清肌酐更早期、更敏感反映AKI。有學者在一項研究中監測了635例急診科患者的尿NGAL水平,結果發現,尿NGAL在診斷AKI具有較高的敏感性和特異性(分別為90%和99%)。其他的一些研究也都發現NGAL,是預測AKI的早期可靠的生物標志物,因此,有人認為,在所有的生物標志物中NGAL可能是最有潛質的。NGAL不僅存在于尿液中,同樣也存在于血漿中,測定血漿中NGAL濃度對診斷更加有利,因為它既能避免因極度少尿帶來的麻煩,又能減輕因治療而使用利尿藥等帶來的干擾。但有研究顯示,在并發癥相對少的AKI患者中,NGAL的敏感性、特異性是比較好的,但存在并發系統性感染、炎性反應性疾病及惡性疾病等時,血NGAL水平可能會受患者自身疾病狀況的影響。

NGAL不僅是急性腎損傷的重要分子標志物,同時還與多種疾病的發生相關,但許多功能及機制均需進一步明確;無論如何,NGAL在疾病中的重要性已獲得大家的重視,通過與同類型疾病對比,基于先進的研究手段,NGAL在疾病發生發展中的分子機制會得以闡明,這不僅有助于在基因分子水平上深化對疾病機制的認識,也有助于將NGAL轉化為各種疾病臨床診斷及治療的新靶點。

u市場分析

2011年1月,NGAL檢測項目開始在歐洲主要醫院開展。NGAL的檢測最初采用western blotting法,2005年丹麥Bioporto公司首先推出ELISA商品試劑盒,可用于血清(漿)、尿液的NGAL檢測。目前已有適用于全自動免疫分析儀的分析系統面世,應用免疫分析儀(ArchitectTriage)檢測NGAL比ELISA法的診斷效能好,但其檢測限要遜于ELISA 。NGAL尚無決定性方法,一級參考材料及通用的標準品或校準物,各系統間測定結果也存在一定差異,每個商品化分析體系都有各自的參考值范圍,不利于臨床醫生分析結果。NGAL檢測的標準化工作將是國內外研究的一個重點方向,如:建立NGAL檢測的標準化程序,研究決定性方法參考方法,規定常規方法,制備合適的參考材料和標準物質等,使不同方法不同試劑盒(及批號)不同實驗室的檢測結果間具有可比性。

NGAL檢測試劑盒的產業化徹底地改變了目前臨床醫生無法及時診斷患者急性腎損傷的現狀,比原本臨床發現檢測到NGAL大大提前了20到48小時,特別是對心臟支架造影等對比劑腎病患者、ICU、腎病科等急性患者在床邊一分鐘檢測出NGAL,及早干預病情,填補了行業內空白。目前國內已有多家試劑公司獲得了中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白測定試劑盒的注冊證,方法學主要以膠乳增強免疫比濁法為主,其原理是:樣本中的中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白與試劑中羊抗人中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白單克隆抗體的致敏乳膠顆粒反應,出現凝集反應,在特定的波長下檢測其吸光度的變化,其變化程度與樣本中的NGAL含量成正比。該方法選擇了超敏化的抗人NGAL抗體乳膠顆粒,與抗原抗體直接反應相比,抗體包被在乳膠顆粒上與抗原反應能使敏感性更高,抗干擾性更強,且可測線性范圍也更寬,且操作簡單,能利用普通的生化分析儀進行檢測,容易實現自動化,可在各級基層醫療機構普及和應用。

夸克為了順應市場需求,完善客戶服務,于2011年開始著手于中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白測定試劑盒的研發,時至今日已取得了很大的進展。為確保產品優良的穩定性、準確度和靈敏度等性能,我們采用進口原料,并在多家三甲醫院進行了臨床評估,其良好的性能得到了驗證,即將投入市場。